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一、細胞培養基礎知識培訓

1、細胞培養概述

2、細胞培養所需設備與培養用液

3、培養細胞的生物學特征

4、原代培養與傳代培養、凍存與復蘇

5、細胞培養常見問題及解決方法

詳情請下載 細胞培養基礎知識培訓


二、細胞凋亡與增殖檢測知識培訓

01 細胞增殖與活力檢測
膜損傷檢測
代謝活性檢測
DNA合成檢測
熒光標記檢測
目錄 ATP水平測定

02 細胞凋亡與增殖檢測
磷酯酰絲氨酸外翻檢測
線粒體膜電位檢測
DNA片段化檢測
Caspase活性檢測
熒光標記細胞形態檢測

詳情請下載 細胞凋亡與增殖檢測知識培訓


三、熒光素酶報告基因基礎知識培訓
報告基因系統廣泛應用于真核生物基因表達和細胞生理學研究,包括受體活性、轉錄因子、細胞信號轉導、mRNA加工和蛋白質折疊等。“雙報告基因”通常被用來提高實驗精確度,即在一個系統中同時表達和測量兩個獨立的報告基因。一般來說,實驗組報告基因與具體實驗條件的影響是相關的,而共同轉染的內對照組報告基因則是用來充當校正參數,作為內參提供反應基線。將實驗組的結果與內對照組的結果進行約化處理,可降低由細胞存活率或轉染效率的差異而導致的結果波動,同時還可消除由取樣體積、細胞裂解效率和儀器測定引起的實驗誤差。因此,雙報告基因檢測可以通過減少外部影響來獲得更可靠的實驗數據。應用于啟動子活性檢測、miRNA靶基因驗證 (針對3’UTR元件),本文就報告基因種類,特點,檢測原理等進行介紹。
詳情參見雙酶報告基因基礎知識培訓

四、細胞蛋白熒光標記知識培訓
許多類型的熒光試劑相繼被開發用于細胞染色,化學標記蛋白質、核酸和其他生物分子。當特定抗體或純化的生物分子被熒光染料化學標記后,它們就成為檢測靶抗原的熒光探針,可被應用于細胞成像、高通量分析、流式細胞術、western blotting和ELISA等。Meilunbio?可為您提供廣泛的熒光試劑產品包括細胞標記,蛋白標記,其他熒光染料等。本文就如何進行細胞標記、蛋白標記,從其原理及操作進行了介紹,并闡述了常見問題的應對措施。

詳情參見細胞蛋白熒光標記知識培訓


五、蛋白提取基定量礎知識

蛋白質參與生物體內幾乎所有的生命活動,對蛋白質的研究有助于揭示生命活動現象和分子生物學機理,蛋白質的提取是研究蛋白質的第一步,通常是提取特定組織細胞中的總蛋白,或是處于細胞特定位置的蛋白質,蛋白質提取實驗的成敗,直接影響后續的蛋白質檢測和提純等實驗操作。 蛋白質的精確定量是蛋白質相關實驗所必需的,蛋白質定量可以分為總蛋白定量和單種蛋白定量,總蛋白定量分析有多種不同方法,包括紫外吸光值檢測法、Lowry檢測法、BCA檢測法和Bradford檢測法等。單種蛋白定量主要包括酶聯免疫吸附實驗(ELISA),Western blot和質譜分析等。詳情請參考蛋白提取定量新手上路


六、蛋白電泳及免疫印跡基礎知識培訓

電泳是帶電顆粒在電場作用下向著與其本身所帶電荷相反的電極移動的現象,而聚丙烯酰胺凝膠蛋白電泳是帶有電荷的蛋白質在聚丙烯酰胺凝膠的介質中向其所帶電荷相反的電極移動,又因為聚丙烯酰胺凝膠孔徑的關系,使不同分子量的蛋白質分離開。按照制備凝膠的支持物形狀和電場方向可分成多種不同的電泳技術,本文主要講述使用最廣泛的垂直平板凝膠電泳,這種電泳的優點是可以在同一條件下,在同一凝膠中對多種樣品進行電泳。

蛋白免疫印跡,也稱為Western blotting,是從多種復雜蛋白質中檢測目的蛋白質的一種方法,這種技術誕生于20世紀70年代,由Towbin等人發明了該項技術,現在已經成為蛋白質分析的常規技術。該實驗流程是將處理好的蛋白樣品依據蛋白質的分子量、電荷數和等電點等性質對其進行電泳分離,然后轉移到固相載體上,再利用抗體和抗原之間的特異性結合的原理,通過抗體(一抗)識別所要研究的蛋白質,然后用能夠與一抗特異性結合的抗體(二抗)識別一抗,二抗一般會偶聯能夠檢測的酶,通過對酶濃度的檢測,從而對目的蛋白質進行定性或半定量實驗。綜上所述,免疫印跡可以分為兩個步驟:一是蛋白質由凝膠轉移至固相載體;二是對目的蛋白的特異性檢測。

請參考蛋白電泳免疫印跡基礎知識培訓


七:實驗動物模型基礎知識
實驗動物模型制作原則
實驗動物用藥量的計算
實驗動物給藥方法
常見疾病模型造模方法
請參考實驗動物模型基礎知識

八:信號通路研究方法策略基礎知識
信號蛋白表達水平分析
信號蛋白在細胞內定位
關鍵信號分子抑制或增強
請參考信號通路研究方法策略基礎知識





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